1、外植體（tǐ）的（de）采集及處理：9-10月挖無病害的地下莖，切成1-1.5厘米長根（gēn）並消毒處理。2、誘導外植體生長與分化：接種前要用刀去（qù）除接觸過消（xiāo）毒液的斷麵，露出新鮮組織。3、繼代增（zēng）殖：每30天左右繼代一次，增殖係（xì）數控製在3倍左右。4、生根與移栽：根長約1.0cm時，可馴化移植。
一、外植體的采集及處理
秋天（9~10月）挖地黃（huáng）地下直（zhí）徑約（yuē）1.0cm，挖無病蟲害的強根莖，用洗滌靈和自來（lái）水洗淨，切成1.0~1.5cm長根。在超淨工作（zuò）台上用75%的酒精衝洗30%，用0.1%的水銀（yín）消毒7~8毫米，用無菌（jun1）水衝洗5~6次。
二、誘導外植體生長與分化
用滅菌剪刀或（huò）解剖刀去除與消毒（dú）液接觸的斷麵（miàn），並（bìng）暴露新鮮組織。根段立即接（jiē）種到培養基MS6-BA0.05~2.0mg/LNAA0.01~0.5mg/L。請注意不（bú）要把下端朝上。接種的材料在溫度24℃左右、光12h/d、光（guāng）強度1500lx下（xià）培養。接種1周後，根部開始出現（xiàn）黃綠芽點（diǎn），15d左右出現不定芽，30-40天後芽出現2.0~3.0cm。
三、繼代增殖（zhí）
取下上述芽苗，接種培（péi）育基（jī）MS6-BA1.5mg/LNAAO.1mg/L，10分鍾後芽苗基部產生芽叢（3~5分鍾），20~30分鍾後新芽生長到1.0~2.0分鍾左右。每30天左右繼代一次，增殖（zhí）係數控製在3倍左（zuǒ）右，保持芽苗良好增殖，同時獲得壯（zhuàng）苗。
四、生根與（yǔ）移栽
將高達3.0cm左右、成長結實（shí）的無根（gēn）苗（miáo）分為單株接種到培育基礎12MSNAAA0.05mg/L，一般在15天後產（chǎn）生大量根係。根長約（yuē）1.0cm時，可馴化移植。方法是將試管苗放在溫（wēn）度25℃、濕度75%的玻（bō）璃溫室裏，用鑷子輕輕地從瓶子裏取出苗，用稀釋0.125%~0.142%藥液的（de）百菌清洗剩下的瓊脂培養基，移植到消毒處理的基質（珍珠岩:蛭石=1:1）。移植後的溫度保持（chí）在24~25℃，濕度在80%以上，成（chéng）活率在90%以上。
