1、準（zhǔn）備工作：將鑷子、EP管、槍頭等工具（jù）放入高壓滅菌鍋中進行殺菌。
2、消毒處理（lǐ）：用酒精對雙手和鑷子做（zuò）消毒處理，隨即（jí）取出EP管放入（rù）試劑（jì）盒中。
3、放（fàng）入菌種：用移液槍取（qǔ）出甘油，放入EP管，再將菌種放入管中。
4、低溫保存：蓋（gài）好蓋子，做好標注，將所有菌種裝入袋中，最後把袋子放在冰（bīng）箱中保存（cún）。
一、甘油保藏菌種實驗過程
1、準備工作
準備好鑷子（zǐ）、EP管（guǎn）、槍頭等工具，再將它們放入高壓滅菌鍋中做殺菌處理（lǐ）。
2、消毒（dú）處理
在手上擦（cā）拭酒精，並對鑷子消毒，然後用鑷子取出10支（zhī）EP管並放（fàng）入試劑盒中。
3、放入菌種
用移（yí）液槍取（qǔ）出50%的甘油，然後放入EP管中（zhōng），再取出（chū）菌種放入EP管。
4、低溫保（bǎo）存
蓋上蓋子（zǐ），做好標（biāo）注（zhù），再（zài）將所（suǒ）有菌種都裝入（rù）袋中（袋子也要做好標注），最（zuì）後把袋子放入冰箱（xiāng）內保存，溫度控（kòng）製在零下（xià）20℃。
二、甘油保藏菌種原理
1、保藏原理
甘油可以作為菌種（zhǒng）的保護劑，在低（dī）溫冷凍的條件下，微生物的新陳（chén）代謝（xiè）趨於停止，此時（shí）即可達到長期、有效地保藏菌（jun1）種（溫度越低，保藏效（xiào）果越好）。
2、注意事項
（1）應使用非選擇性的增菌培養基（jī），因為微生物（wù）在選（xuǎn）擇性培養基中生（shēng）長（zhǎng）時可能會丟（diū）失某些生物特性，而且保（bǎo）藏的菌（jun1）種的生物（wù）特性可能（néng）和標準菌株的特性（xìng）有所差異。
（2）菌液的濃度越大，菌種的保存時間越長。保藏細菌常使用菌液，保藏黴菌（jun1）常使用無菌（jun1）水或用生理鹽水製備成的孢子懸液。
（3）甘油的（de）最終濃度為10-20%。甘油原液過於粘（zhān）稠，需配製適宜的（de）甘油水溶液，將菌（jun1）懸（xuán）液和甘油按照1：1的體積比例充分混勻，再分（fèn）裝至經過滅（miè）菌處理的保藏管中，最後放入零下70-80℃的冰（bīng）箱中保存。
（4）甘油適合中長期（qī）菌種（zhǒng）保藏（cáng），保藏時間為2-4年左（zuǒ）右。
