1、對樣(yàng)本去皮(pí)、去脂,再用均質(zhì)器均質(zhì)樣本,隨即稱取適量的均質物至離心管內。
2、依次(cì)加入蒸餾水、試(shì)劑A及衍生化(huà)試(shì)劑,振蕩混(hún)勻後孵育30分鍾。
3、依次加入試劑B、試劑C、提取劑,並振蕩混勻。
4、在(zài)室溫下離(lí)心5分鍾,然後取上層有機相至離心管中,再用氮氣吹幹。
5、向淨化劑(jì)溶解幹燥(zào)物中加入試劑D,並振蕩混勻,離心2分鍾後待檢。
一、雞新城疫(yì)抗(kàng)體檢測過程
1、對魚蝦蟹、畜禽(qín)肉、內髒等樣本做去皮、去脂肪等處理,再用均質(zhì)器均質樣本,然後稱(chēng)取3±0.05克均質物(wù)至15毫升的離(lí)心管內。
2、依次加入蒸餾水4毫升、試劑A0.5毫升(shēng)、衍生化試劑0.6毫升,振蕩混勻(yún)後,於65℃的水浴中(zhōng)孵育30分鍾。
3、依(yī)次(cì)加入試劑B1毫升、試劑C0.4毫升、提取劑1瓶(4毫升/瓶),隨即振蕩(dàng)混勻。
4、在室溫下(20-25℃)以4000r/分鍾的速度離心5分鍾,取2毫升上層有機相至5毫升(shēng)的離心管內,在50-60℃水浴中用氮氣(或空氣吹幹儀)吹幹。
5、取1毫升淨化劑溶解幹燥物,再加(jiā)入0.5毫升(shēng)試劑D,並振蕩(dàng)混勻,然後在室溫下(20-25℃)以4000r/分鍾的速度離心2分鍾,最(zuì)後待檢。
6、若使用全血標本進行檢測,標本的移動速度可能較慢,必要時(shí)可在加樣60秒後,向加樣孔內滴入1滴(dī)PBS作輔助液,以促進標本移動。
二、雞新城疫的(de)症狀(zhuàng)表現
1、急性型
(1)病雞呼吸困難,會發出“咕嚕”的特殊怪聲。
(2)病雞的嘴、鼻中(zhōng)有大量黏液,產蛋量下降。
(3)病雞出現下痢,其糞便的顏色為黃白色或綠色,有麻痹和神(shén)經症狀。
2、最急性型
此類症狀大多出現在(zài)3-4周(zhōu)齡的小雞身上,小雞發病時一般不會出現任何症狀,但卻(què)會快速死亡。
3、亞急性或慢性型
常發生在成年雞身上,病雞會出現(xiàn)跛(bǒ)行、麻(má)痹、痙攣、運動失調、肌肉抽搐等症(zhèng)狀,產蛋雞發病(bìng)後期產量會有所降低。
4、非典(diǎn)型性新城疫
病雞出現(xiàn)咳嗽、呼吸困難的現象,且伴有分泌物、神經症狀,蛋雞、種(zhǒng)雞發病後會降低(dī)產蛋量。